| 用途

      本试剂盒用于体外定量检测大鼠 血清、血浆、或其他生物液中(5-HT) 浓度。 

| 实验原理

     本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 5 羟色胺(5-HT)水平。用纯化的大鼠 5 羟 色胺(5-HT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 5 羟色胺(5-HT)， 再与 HRP 标记的 5 羟色胺(5-HT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗 涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的 5 羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定 吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠 5 羟色胺(5-HT)浓度 。

| 基本性能

| 试剂盒组份及储存

说明；未拆封的试剂盒可以在2-8℃ 保存六个月.

| 试剂盒所需自备物品。

 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 

 2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 

 3.37℃恒温箱 

 4. 双蒸水或去离子水 

 5. 吸水纸 

 6. 加样槽

| 样品收集方法（具体处理方法请咨询）

1.  血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右  （2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中  如出现沉淀，应再次离心。

2.  血浆：应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成应该再次离心。

3.  尿液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将剪碎的组织与 对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9 mL的PBS，具体体积可根据实验需要适 当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步 裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g 离心5-10分钟取 上清检测。

5.  细胞提取液：贴壁 细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5分钟后收集细胞。悬浮 细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每106个细胞中加入150-200 μL PBS重悬(推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃，1500×g离心10分钟，取上清检测。

6. 细胞培养上清或其他生物体液；收集液体后于2-8℃，1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片，取上清检测。

| 试剂盒注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-