组合RhoA/Rac1/cdc42 活化检测试剂盒

       小G蛋白家族中最重要的是Rho家族蛋白中的Rac1、RhoA和Cdc42, 这三种蛋白相互协调、相互依赖,共同调节骨架蛋白的结构重组和形成, RhoA/Rac1/Cdc42的作用相反,Rac1/Cdc42对神经元的发生、迁移、生长、维持等起到促进作用,而RhoA对神经元的形成和维持起到抑制作用。体内Rho有两种形式,即GDP结合的无活性状态与GTP结合的活性状态。并且,通过体内三类蛋白,即鸟苷酸转换因子(guaninenucleotide exchange factor,GEF)、GTPase激活因子(GTPase activating protein,GAP)与鸟甘酸解离抑制子(guanine nucleotide dissociation inhibitor,GDI),有序地调控Rho蛋白活性状态的转换。它还参与许多生理活动，包括细胞迁移、粘附、胞质分裂、增殖、分化和凋亡，并在更大程度上参与细胞转化,在肌动蛋白细胞中, Cdc42,Rho,Rac在信号传导的过程中起着重要的作用。学习他们之间的串扰和互相之间的反馈对研究他们之间的相互反应可以提出很多不错的建议。同时，对Rho蛋白家族的时空动力学的观测可以为空间极性和Cdc42/Rac和Rho提供证据.

组合RhoA/Rac1/cdc42 活化检测试剂盒的用途：
 

 研究 Rac1 ,RhoA,和 Cdc42 信号通路之间的细胞型特异性串扰。
 研究 Rho 家族小G蛋白激活 对其他信号通路的影响。
 体内 Rac1/RhoA/Cdc42 激活水平的分析。
 检测增强 Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白质。
 检测抑制 Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白质。
 对细胞(组织) 中的Rac1/RhoA/Cdc42  的活性进行定位,定量,定性分析 

组合RhoA/Rac1/cdc42 活化检测试剂盒的原理：

Rac1激活检测原理：利用特异性识别Rac1-GTP空间构象的单克隆抗体，能够与细胞或者组织中的蛋白的GTP 空间构象结合，然后然后利用Protein A/G将抗原抗体的结合物吸附下来，再利用特异性识别 Rac1的兔多克隆抗体进行免疫印迹分析进行检测。
RhoA激活检测原理：利用特异性识别RhoA-GTP空间构象的单克隆抗体，能够与细胞或者组织中的蛋白的GTP 空间构象结合，然后然后利用Protein A/G将抗原抗体的结合物吸附下来，再利用特异性识别 RhoA的兔多克隆抗体进行免疫印迹分析进行检测。
Cdc42激活检测原理：利用特异性识别cdc42-GTP空间构象的单克隆抗体，能够与细胞或者组织中的蛋白的GTP 空间构象结合，然后然后利用Protein A/G将抗原抗体的结合物吸附下来，再利用特异性识别 cfc42的兔多克隆抗体进行免疫印迹分析进行检测。

Rac1 激活示例图片：

RhoA激活示例图片：

 Cdc42 激活示例图片：

                       与传统的 GST- pull down 方法相比，该试剂盒具有以下明显优势

1.灵敏度高；诱导蛋白与目标蛋白中的结合对蛋白量的要求比较高。而抗体与蛋白的结合对样本中蛋白的要求比较少。

2. 特异性强；因为诱饵蛋白是需要加上GST标签的重组蛋白，所以是非生理状态下的验证，蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异，而抗体与目标蛋白的结合 ，活细胞状态下蛋白质之间的相互作用被保持，所以其反映的是细胞中真实的蛋白情况.

3. 应用更为广泛；试剂盒中能够特异性识别GTP结合状态的三聚体G蛋白或者小G蛋白的单克隆抗体，适应各种种属（Human，Mouse，Rat，Rice plants，Pig Cotton，bacteria，Escherichia coli等）应用范围非常广泛（ IP ,WB ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等）随着这些应用的普及，G 蛋白信号转导的研究进展，必将进一步加快。